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液相色譜系統(tǒng)中液相色譜法開始階段是用大直徑的玻璃管柱在室溫和常壓下用液位差輸送流動(dòng)相，稱為經(jīng)典液相色譜法，此方法柱效低、時(shí)間長（常有幾個(gè)小時(shí)）。液相色譜法(HighperformanceLiquidChromatography，HPLC)是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上，于60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來的。液相色譜法與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻，小顆粒具有高柱效，但會(huì)引起高阻力，需用高壓輸送流動(dòng)相，故又稱高壓液相色譜法(HighPressureLiquid...

1、氣泡溢出流動(dòng)相內(nèi)有氣泡，關(guān)閉泵，打開泄壓閥，打開purg鍵，清洗脫氣，氣泡不斷從過濾器冒出，進(jìn)入流動(dòng)相，無論打開purge鍵幾次，都無法清除不斷產(chǎn)生的氣泡。原因過濾器長期沉浸于乙酸銨等緩沖液內(nèi)，過濾器內(nèi)部由于霉菌的生長繁殖，形成菌團(tuán)，阻塞了過濾器，緩沖液難以流暢地通過過濾器，空氣在泵的壓力作用下經(jīng)過濾器進(jìn)入流動(dòng)相。處理過濾器浸泡于5%硝酸溶液中，超聲清洗幾分鐘即可；亦可將過濾器浸泡于5%硝酸溶液中12～36小時(shí)，輕輕震蕩幾次，再將過濾器用純水清洗幾次，打開泄壓閥，打開pu...

進(jìn)樣閥在進(jìn)樣過程中，必須是非常清潔的，否則得不到較好的結(jié)果。進(jìn)樣閥切換到進(jìn)樣位置(Inject)后，要在此位置保持一段時(shí)間，使活動(dòng)相充分沖洗樣品定量管，這樣可以保證有較高的度，而且不用另外再?zèng)_洗樣品定量管。這種由色譜儀器控制的沖洗顯然要比手動(dòng)沖洗更好些。留意：沖洗需要的活動(dòng)相體積至少為所進(jìn)樣品體積的10倍。例如，假如取20μL樣品至100μL樣品定量管中，而活動(dòng)相此時(shí)的流速為1mL/min，則需要在進(jìn)樣位置至少保持12s，即：20μL×10/1000μL·min-1=0.2m...

常見故障液相色譜儀系統(tǒng)可能出現(xiàn)的故障是：1.流動(dòng)相脫氣不充分；2.流動(dòng)相供給不暢；3.流動(dòng)相和貯液器被污染等。一、流動(dòng)相脫氣不充分流動(dòng)相受熱，或者流動(dòng)相不同組分混合時(shí)會(huì)有氣體產(chǎn)生，氣泡進(jìn)人泵內(nèi)引起壓力波動(dòng)，增加噪音，色譜圖上出現(xiàn)毛刺?？稍囉孟铝蟹椒ń鉀Q問題流動(dòng)相再脫氣采用更有效的脫氣方法(如通氮?dú)獗Ｗo(hù))或兩種方法配合使用改系統(tǒng)內(nèi)混合為系統(tǒng)外低壓預(yù)混合。如果仍有毛刺，應(yīng)考慮在檢測器后面加阻尼器。二、流動(dòng)相供給不暢流動(dòng)相供給不暢可能的原因是流動(dòng)相已接近用完了，管路中吸人氣體引起泵...

制備液相色譜中，有三個(gè)可以觀察到的狀態(tài)：柱壓、檢測器基線、譜圖。通過觀察和記錄這三個(gè)狀態(tài)可以監(jiān)測儀器是否正常。若某個(gè)狀態(tài)出現(xiàn)異常，故障排查和解決方案如下。1、柱壓波動(dòng)1）吸液管路進(jìn)氣泡①溶劑不足，吸濾頭吸入空氣，添加溶劑并排氣泡。②吸濾頭臟了或堵塞，用異丙醇（或5%稀硝酸）清洗。③溶劑中有氣泡（尤其兩種以上溶劑混合），超聲（或抽濾）脫氣。2）泵流量不穩(wěn)①單向閥堵塞，大流速purge，若不能解決，則需拆下單向閥（異丙醇）超聲清洗清洗或更換單向閥。②柱塞密封圈磨損，更換密封圈。③...

1.及時(shí)清洗色譜系統(tǒng)平時(shí)分析好樣品，清洗好色譜柱后，用一根PEEK管連接在原先接色譜柱位置，用脫氣的純水以1.5mL/min流速清洗1.5小時(shí)，后用甲醇用同樣條件清洗。自動(dòng)進(jìn)樣器清洗液換上甲醇，打開排液閥，用針筒抽吸越50mL，再關(guān)閉排液閥，purge，rinse各三次，結(jié)束后按shift，9，關(guān)閉自動(dòng)進(jìn)樣器。純水清洗色譜系統(tǒng)能清除管路中殘存的緩沖鹽，甲醇清洗，防止系統(tǒng)滋生細(xì)菌和微生物堵塞管路，也可以洗去不溶于水的物質(zhì)。2.定期更換Septumcutout定期更換Septum...

液相色譜系統(tǒng)主要由貯液瓶、泵、進(jìn)樣器、柱子、柱溫箱、檢測器、數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)組成。對(duì)于整個(gè)系統(tǒng)而言，柱子、泵和檢測器是核心部件同時(shí)也是易出問題的主要部位。液相色譜柱常見故障排除方法：1、若操作過程發(fā)現(xiàn)壓力很小，則可能管件連接有漏，注意檢查。當(dāng)出現(xiàn)錯(cuò)誤警告(各組件指示燈均為紅色)，一般為漏液，其中一個(gè)感應(yīng)器中已有溶劑，漏液故障排除后，擦干，點(diǎn)擊Online操作界面中的Instrument/SystemOff，然后再點(diǎn)擊操作界面中的Instrument/SystemOn即可。2、連接...

制備型加壓液相色譜，按照色譜柱和樣品量的大小，分為：（1）低壓液相色譜；（2）中壓液相色譜；（3）高壓液相色譜；（4）快速色譜。低壓、中壓與高壓液相色譜的壓力范圍之間會(huì)存在一定交疊，沒有統(tǒng)一、明確的標(biāo)準(zhǔn)。1.快速色譜柱壓通常為2bar（或30psi）左右，對(duì)于那些容易分離的簡單混合物，由于快速色譜具有操作簡便、經(jīng)濟(jì)等優(yōu)點(diǎn)，常常是實(shí)驗(yàn)室的。但快速色譜不同于一般的層析分離，這種分離沒有壓力，而快速分離通常使用瓶裝氮?dú)饧訅?，使流?dòng)相具有一定的流速，從而縮短了分離時(shí)間。快速色譜使用的...