高效液相色譜儀的原理是利用不同待分離物質(zhì)在兩相中的親和力差異,如分配系數(shù)、吸附容量等。利用外力,含有樣品的流動(dòng)相(氣體、液體)通過固定在柱或平板上的固定相表面,該固定相與流動(dòng)不相溶。當(dāng)流動(dòng)相中攜帶的混合物流經(jīng)固定相時(shí),混合物中的組分與固定相相互作用。
目前本產(chǎn)品可廣泛用于教學(xué)、科研、中西制藥、農(nóng)藥、環(huán)保、防疫、商檢、食品、飼料、石化、煤炭、染料、精細(xì)化工、生物工程等行業(yè)。
1、配置好實(shí)驗(yàn)所需的流動(dòng)相和純甲醇,經(jīng)過濾超聲后備用。
2、打開泵電源,將泵的壓力上限設(shè)置為40MPa。
a、將泵的過濾頭輕輕放入到新配好的純甲醇中,設(shè)置流量為1ml,然后按“啟動(dòng)/停止”鍵開始走液,經(jīng)過10-20分鐘后按“啟動(dòng)/停止”鍵停止走液。
b、將泵的過濾頭輕輕放入到新配好的甲醇水中,然后按“啟動(dòng)/停止”鍵開始走液。
c、打開檢測(cè)器電源,調(diào)整好檢測(cè)器的波長(zhǎng)280,然后按“調(diào)零”鍵調(diào)零。
3、打開電腦上色譜工作站,左上方出現(xiàn)握手圖標(biāo),說明工作站已連接儀器。然后查看基線等基線走直即可進(jìn)樣。
4、進(jìn)樣之前先看基線在不在界面內(nèi),如果不在按“調(diào)零”鍵調(diào)零,之后再開始進(jìn)標(biāo)樣,將液體進(jìn)樣閥扳到“LOAD”位置,將標(biāo)樣打入液體進(jìn)樣閥內(nèi),再把液體進(jìn)樣閥扳到“INJECT”位置,此時(shí)工作站已啟動(dòng),等峰出完后點(diǎn)“停止”鍵。
5、做校正曲線:
a、編輯定量參數(shù):
點(diǎn)擊“定量參數(shù)”圖標(biāo),彈出方法編輯窗口:設(shè)置好“定量方式:(峰面積)”、“定量方法(外標(biāo)法)”、“標(biāo)準(zhǔn)(1個(gè)濃度標(biāo)樣,選‘1點(diǎn)’”)、“次方(1次)”、“標(biāo)樣濃度單位(%)”、“樣品結(jié)果單位(%)”。
b、填寫組份表:點(diǎn)擊“組份表”圖標(biāo),彈出方法編輯窗口,填入所分析的樣品組份名稱(辣椒素)、保留時(shí)間(5.2分鐘左右)及標(biāo)準(zhǔn)濃度(100)。
c、定義校正曲線:
點(diǎn)擊“校正曲線”圖標(biāo),彈出方法編輯窗口。
定義各點(diǎn)對(duì)應(yīng)的色譜峰文件。即先用鼠標(biāo)指向標(biāo)樣點(diǎn)號(hào),然后單擊左鍵,則該點(diǎn)號(hào)被藍(lán)框覆蓋,再單擊右鍵,彈出右鍵可選菜單:
選擇“增加”項(xiàng),彈出“譜圖選擇”窗口。
然后在此選擇相應(yīng)的譜圖文件,則該序號(hào)點(diǎn)的文件前出現(xiàn)一個(gè)“+”號(hào)。各個(gè)點(diǎn)定義完成后,單擊“重校正”即可顯示出校正曲線。點(diǎn)“確認(rèn)”鍵。
6、進(jìn)樣品,出完峰后點(diǎn)停止,點(diǎn)屏幕報(bào)告即可查看結(jié)果。如有多個(gè)樣品,可重復(fù) 進(jìn)樣品 此步驟即可。
7、查看以前樣品結(jié)果:進(jìn)入“再處理”界面,點(diǎn)擊“打開數(shù)據(jù)文件”圖標(biāo),彈出“譜圖選擇”窗口在此選擇樣品譜圖文件,如下:然后要單擊“重新計(jì)算”按鈕,再點(diǎn)擊“屏幕報(bào)告”圖標(biāo),即可看到屏幕報(bào)告表:
8、關(guān)機(jī):關(guān)閉檢測(cè)器電源,按“啟動(dòng)/停止”鍵停止泵運(yùn)行,將泵的過濾頭輕輕放入到新配好的純甲醇中,按“啟動(dòng)/停止”鍵開始走液,經(jīng)過10-20分鐘,泵壓力穩(wěn)定后,按“啟動(dòng)/停止”鍵停止走液,關(guān)閉泵電源。電腦不用可提前關(guān)閉。用純甲醇或純凈水清洗一下液體進(jìn)樣閥。