高效液相色體包括儲液器、輸液泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀或數(shù)據(jù)工作站等幾部分譜儀一般由溶劑輸送系統(tǒng)、進樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理與記錄系統(tǒng)組成。高效液相色譜儀是應(yīng)用高效液相色譜原理,主要用于分析高沸點不易揮發(fā)的、受熱不穩(wěn)定的和分子量大的有機化合物的儀器設(shè)備。
高效液相色譜儀采用數(shù)字化通信,通過個人電腦可以全控液相色譜系統(tǒng)的各單元的各項操作以進行等度分析、多元高壓梯度分析、波長掃描及光譜掃描等功能。液相色譜原理,主要用于分析高沸點不易揮發(fā)的、受熱不穩(wěn)定的和分子量大的有機化合物的儀器設(shè)備。廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、食品科學(xué)、藥物研究以及環(huán)境研究中。
高效液相色譜儀操作工序:
1、配置好實驗所需的流動相(甲醇:水=8:2)和純甲醇,經(jīng)過濾超聲后備用。
2、打開泵電源。將泵的壓力上限設(shè)置為40MPa。
a、將泵的過濾頭輕輕放入到新配好的純甲醇中,設(shè)置流量為1ml,然后按“啟動/停止”鍵開始走液,經(jīng)過10-20分鐘后按“啟動/停止”鍵停止走液;
b、將泵的過濾頭輕輕放入到新配好的甲醇水中,然后按“啟動/停止”鍵開始走液;
c、打開檢測器電源,調(diào)整好檢測器的波長280,然后按“調(diào)零”鍵調(diào)零。
3、打開電腦上的UC-3268色譜工作站,左上方出現(xiàn)握手圖標(biāo),說明工作站已連接儀器。然后查看基線等基線走直即可進樣。
4、進樣之前先看基線在不在界面內(nèi),如果不在按“調(diào)零”鍵調(diào)零,之后再開始進標(biāo)樣,將液體進樣閥扳到“LOAD”位置,將標(biāo)樣打入液體進樣閥內(nèi),再把液體進樣閥扳到“INJECT”位置,此時工作站已啟動,等峰出完后點“停止”鍵。
5、做校正曲線:
a、編輯定量參數(shù):
點擊“定量參數(shù)”圖標(biāo),彈出方法編輯窗口:設(shè)置好定量方式:(峰面積)、定量方法(外標(biāo)法)、標(biāo)準(zhǔn)(1個濃度標(biāo)樣,選1點)、次方(1次)、標(biāo)樣濃度單位(%)、樣品結(jié)果單位(%);
b、填寫組份表:點擊“組份表”圖標(biāo),彈出方法編輯窗口,填入所分析的樣品組份名稱、保留時間及標(biāo)準(zhǔn)濃度(100);
c、定義校正曲線:
點擊“校正曲線”圖標(biāo),彈出方法編輯窗口。
定義各點對應(yīng)的色譜峰文件。即先用鼠標(biāo)指向標(biāo)樣點號,然后單擊左鍵,則該點號被藍框覆蓋,再單擊右鍵,彈出右鍵可選菜單:
選擇“增加”項,彈出“譜圖選擇”窗口。
然后在此選擇相應(yīng)的譜圖文件,則該序號點的文件前出現(xiàn)一個“+”號。各個點定義完成后,單擊“重校正”即可顯示出校正曲線。點“確認(rèn)”鍵。
6、進樣品,出完峰后點停止,點屏幕報告即可查看結(jié)果。如有多個樣品,可重復(fù) 進樣品 此步驟即可。
7、查看以前樣品結(jié)果:進入“再處理”界面,點擊“打開數(shù)據(jù)文件”圖標(biāo),彈出“譜圖選擇”窗口在此選擇樣品譜圖文件,如下:然后要單擊“重新計算”按鈕,再點擊“屏幕報告”圖標(biāo)。
8、關(guān)機:關(guān)閉檢測器電源,按“啟動/停止”鍵停止泵運行,將泵的過濾頭輕輕放入到新配好的純甲醇中,按“啟動/停止”鍵開始走液,經(jīng)過10-20分鐘,泵壓力穩(wěn)定后,按“啟動/停止”鍵停止走液,關(guān)閉泵電源。電腦不用可提前關(guān)閉。