液相色譜儀一般采用隔膜注射進(jìn)樣器或高壓進(jìn)樣間完成進(jìn)樣操作,進(jìn)樣里是恒定的。這對提高分析樣品的重復(fù)性是有益的。
系統(tǒng)由儲液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動相,被流動相載入色譜柱固定相)內(nèi),由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),在兩相中作相對運(yùn)動時,經(jīng)過反復(fù)多次的吸附一解吸的分配過程,各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別,被分離成單個組分依次從柱內(nèi)流出,通過檢測器時,樣品濃度玻轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來液相色譜儀主要有進(jìn)樣系統(tǒng)、輸液系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)。
操作步驟如下:
a、打開電源,用Harb相連接時,注意Harb電源,打開計算機(jī),打開BootpServer;
b、自上而下打開個組件電源,BootpServer里顯示有信號時,打開工作站;
c、打開沖洗泵頭的10%異丙醇溶液的開關(guān),控制流量大小,以能流出的zui小流量為準(zhǔn);
d、注意各流動相所剩溶液的容積設(shè)定,若設(shè)定的容積低于zui低限會自動停泵,注意洗泵溶液的體積,及時加液;
e、使用過程中要經(jīng)常觀察儀器工作狀態(tài),及時正確處理各種突發(fā)事件。
2、先以所用流動相沖洗系統(tǒng)一定時間,正式進(jìn)樣分析前30min左右開啟D燈或W燈,以延長燈的使用壽命;
3、建立制備型液相色譜儀色譜操作方法,注意保存為自己命名的Method,勿覆蓋或刪除他人的方法及實驗結(jié)果;
4、使用手動進(jìn)樣器進(jìn)樣時,在進(jìn)樣前和進(jìn)樣后都需用洗針液洗凈進(jìn)樣針筒,洗針液一般選擇與樣品液一致的溶劑,進(jìn)樣前必須用樣品液清洗進(jìn)樣針筒3遍以上,并排除針筒中的氣泡;
5、溶劑瓶中的沙芯過濾頭容易破碎,在更換流動相時注意保護(hù),當(dāng)發(fā)現(xiàn)過濾頭變臟或長菌時,不可用超聲洗滌,可用5%稀硝酸溶液浸泡后再洗滌;
6、實驗結(jié)束后,一般先用水或低濃度甲醇水溶液沖洗整個管路30分鐘以上,再用甲醇沖洗。沖洗過程中關(guān)閉D燈、W燈;
7、關(guān)機(jī)時,先關(guān)閉泵、檢測器等,再關(guān)閉工作站,然后關(guān)機(jī),zui后自下而上關(guān)閉色譜儀各組件,關(guān)閉洗泵溶液的開關(guān);
8、使用者須認(rèn)真履行儀器使用登記制度,不要擅自拆卸儀器。